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TSA 技术
TSA（Thermal Shift assay），是测定蛋白质热转变稳定性的一种技术，可用于大规模筛选特定蛋白的配体。其具体原理为，蛋白质自然状态下，疏水基团隐藏在结构内部。当温度上升时，蛋白质会转化为变性状态，暴露出疏水基团。而暴露出的疏水基团可以与荧光染料Sypro Orange进行结合，并被激发荧光。我们通过检测荧光强度来反映蛋白质的稳定性。华体会体育hth生物拥有丰富的TSA实验经验，通量可达到每周数千个样品。
不同温度下，因蛋白质暴露疏水基团的量不同，荧光的强度也不同，可以此画出荧光-温度曲线图。
Fig 1: 蛋白TSA曲线
当配体与蛋白质结合时，蛋白质的稳定性增加，导致相同温度下暴露的疏水基团减少，我们需要用更高的温度让蛋白质充分暴露疏水基团，这一操作使得荧光-温度曲线图右移。
Fig 2: 蛋白+配体TSA曲线
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